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淺析恒溫?zé)晒鈾z測(cè)儀的工作原理

更新時(shí)間:2023-07-23 點(diǎn)擊量:673
  恒溫?zé)晒鈾z測(cè)儀(ThermalCycler)是一種常用于生物學(xué)和醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的實(shí)驗(yàn)設(shè)備,用于進(jìn)行聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PolymeraseChainReaction,PCR)等溫度敏感實(shí)驗(yàn)。工作原理基于PCR反應(yīng)的溫度變化和熒光信號(hào)的檢測(cè)。PCR反應(yīng)需要在不同的溫度下進(jìn)行,包括DNA解鏈(Denaturation)、引物結(jié)合(Annealing)和DNA擴(kuò)增(Extension)等步驟。通過(guò)精確控制溫度,在每個(gè)步驟中提供適宜的溫度條件。
  

 

  在PCR反應(yīng)過(guò)程中,引物與待擴(kuò)增的靶DNA序列結(jié)合,其結(jié)合的溫度通常較低。當(dāng)溫度被調(diào)升時(shí),引物與靶DNA序列斷開(kāi),使得DNA鏈被解開(kāi)。然后,溫度被降低,引物與靶DNA序列再次結(jié)合。此時(shí),DNA聚合酶開(kāi)始在引物上進(jìn)行擴(kuò)增,生成新的DNA鏈。這個(gè)循環(huán)會(huì)重復(fù)多次,從而擴(kuò)增目標(biāo)DNA序列。
  
  同時(shí),恒溫?zé)晒鈾z測(cè)儀可以檢測(cè)PCR反應(yīng)過(guò)程中的熒光信號(hào)。一般情況下,熒光染料會(huì)與新合成的DNA鏈結(jié)合,生成熒光信號(hào)。通過(guò)監(jiān)測(cè)熒光信號(hào)的增強(qiáng)程度和熒光信號(hào)曲線的變化,可以判斷PCR擴(kuò)增的效果和目標(biāo)序列的存在與否。
  
  恒溫?zé)晒鈾z測(cè)儀通常由以下幾個(gè)主要部分組成:
  
  1.溫控系統(tǒng):用于精確控制和調(diào)節(jié)反應(yīng)體系的溫度。溫控系統(tǒng)通常包括加熱和冷卻裝置,以實(shí)現(xiàn)PCR反應(yīng)中不同溫度階段的切換。
  
  2.熒光檢測(cè)系統(tǒng):用于檢測(cè)PCR反應(yīng)中的熒光信號(hào)。熒光檢測(cè)系統(tǒng)通常包括激發(fā)光源、熒光信號(hào)收集器和熒光信號(hào)檢測(cè)器。激發(fā)光源會(huì)激發(fā)熒光染料產(chǎn)生熒光信號(hào),熒光信號(hào)收集器將熒光信號(hào)聚焦并收集,熒光信號(hào)檢測(cè)器則會(huì)將熒光信號(hào)轉(zhuǎn)換為可視化的數(shù)據(jù)。
  
  3.控制和顯示系統(tǒng):負(fù)責(zé)控制儀器的操作和參數(shù)設(shè)置,并將檢測(cè)到的熒光信號(hào)轉(zhuǎn)換為圖形或數(shù)字化的結(jié)果進(jìn)行顯示??刂坪惋@示系統(tǒng)通常由計(jì)算機(jī)程序或人機(jī)界面構(gòu)成,提供用戶友好的操作界面和結(jié)果展示。
  
  4.試管塊或微孔板:用于容納PCR反應(yīng)液的載體。試管塊或微孔板中的每個(gè)小孔都可以容納一次PCR反應(yīng),方便批量進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。
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